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临床使用常见问题解答

分类：产品知识
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发布时间：2021-12-03
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【概要描述】试剂为什么不能从冰箱中拿出后直接使用?
答：试剂温度过低，在反应室内易发生冷凝集，从而影响结果的准确性。正确的方法是从冰箱取出试剂后，室温平衡十分钟左右。

临床使用常见问题解答

分类：产品知识
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一、试剂为什么不能从冰箱中拿出后直接使用?

答：试剂温度过低，在反应室内易发生冷凝集，从而影响结果的准确性。正确的方法是从冰箱取出试剂后，室温平衡十分钟左右。

二、凝胶卡存放的适宜条件？

答：温度：18-25度保存；避免阳光直射。

三、为什么凝胶卡做抗人球实验可免除洗涤?

答：因为RBC的密度远大于血清中的球蛋白，在给定的离心条件下，当离心时，RBC的沉降速率远大于球蛋白，故RBC首先和凝胶中的抗人球蛋白反应，而不受血清中的球蛋白干扰，从而可免除洗涤这一步骤。

四、为什么用凝胶卡要先加细胞后加血清?

答：因为加细胞的量要比加血清的量大，先加细胞，可以在反应腔内形成大而充分的反应界面，与后加入的血清反应效果良好。

五、镰刀形红细胞贫血病人在做血型配血时易出现假阳性，为什么？

答：正常的红细胞有一定的变形性，可以通过小于其直径的凝胶间隙，而镰形红细胞贫血的病人红细胞变形能力降低，刚性增大，不能透过凝胶间隙，故出现假阳性。

六、严重感染的病人易出现假阳性，为什么？

答：病人血清或血浆中的白细胞过多，堵塞了凝胶间隙，从而影响了红细胞的沉降，造成假阳性。

七、除第五、第六外微柱凝胶假阳性和假阴性反应常见原因

1. 假阳性反应可见于：

（1）未完全去除纤维蛋白原的血清标本，残存纤维蛋白原在凝胶中成为纤维蛋白，阻碍红细胞沉淀而浮于胶中或胶表面。

（2）被检标本染菌也使红细胞浮于胶中或胶表面。

（3）被检红细胞破碎，常见是因为红细胞陈旧，此时即使应该是阴性结果，这是因为离心时微柱管离心力方向和该微管轴方向不一致，本应为阴性的结果的沉淀位置偏离，而拟弱阳性反应。

（4）离心后红细胞沉淀在微柱凝胶管底及近底部一侧，而不是在管底尖部。此为离心时微柱管离心力方向和该微管轴向方向不一致，本应为阴性结果的沉淀位置偏离而呈拟弱阳性反应。

（5）实验室温度低时，因凝胶颗粒活动性减少，单个红细胞穿过时困难，易出现假阳性结果。

2. 假阴性反应。

（1）抗原或抗体过少、过弱。

（2）抗原、抗体比例不合适，如前带或后带的现象。

（3）离心力过大，使弱阳性成为阴性格局。

八、溶血反应现象有哪些原因及临床意义

1. 实验操作者错误或实验标本有问题

发生溶血反应不一定就是抗原抗体特异性反应所致，可能的原因有：

（1）反应液是低渗透压溶液；

（2）受过热或过冷温度影响；

（3）红细胞或抗体被细菌等污染；

（4）其他使红细胞破坏的物理、化学因素。

2. 可能是因为红细胞抗原抗体溶血性反应

（1）红细胞抗原与特异性抗体结合，激活补体，作用于红细胞膜，使之破裂，发生溶血。

（2）红细胞抗原与特异性抗体结合，未激活补体，但因受到血清中其他因子作用而溶血。

3. 溶血的临床意义

一定不能将溶血标本认定是阴性反应，一定要将其记录为溶血反应，不要记录为阳性反应，更不能记录为阴性反应。而且要高度警惕：

（1）发生溶血标本所相应的血液中可能存在阳性的红细胞抗原抗体反应，对患者极有可能有危险，即可能是受供者血型不相容所致，此时抗体应明确为临床有意义抗体。

（2）也极可能是在工作中那个步骤发生了错误。因此，一定不要输用其标本已发生溶血的血液。首先要取新的一份血液，取其标本，应用传统试管血凝法和微柱凝胶方法同时对比检测，选择相容的血液进行输血；一定要在短期内继续查找此次溶血的原因。

九、什么是IgG不完全抗体的Coombs试验？

人红细胞表面抗原与不完全抗体结合（常是IgG类抗体），即不完全抗体致敏红细胞，由于该不完全抗体分子量小或和其两个Fab段扩张角度小，不能使相邻红细胞桥联，红细胞仍是分散状况，不出现肉眼可见的红细胞凝集现象。在反应体系中，加入针对该抗体的抗体，即抗抗体，该抗抗体Fab段结合红细胞上不完全抗体 Fc段，出现肉眼可见的红细胞凝集现象。

十、什么是Coombs试验的应用

1. 直接抗人球蛋白试验；

（1）对新生儿溶血病（HDN）胎儿（婴儿）红细胞检测；

（2）输血反应；

（3）其他溶血性疾病；

2. 间接抗人球蛋白试验；

（1）检测体内不规则抗体；

① 妊娠妇女；

② 献血者；

③ 受血者或有过输血史的人；

（2）交叉配血试验；

（3）对已发现抗体鉴定；

（4）对一些血型抗原的检测，如D弱型，Kell 、Duffy 、Kidd和其他血型检测。

十一、什么是完全抗体和不完全抗体？

在适当的介质（液体、凝胶等）中，能够与相应特异性抗原出现肉眼可见的免疫反应（凝集反应、沉淀反应或溶血反应）的抗体，称之完全抗体；在适当介质中，不能出现肉眼可见的免疫反应的抗体被称之不完全抗体。IgM类抗体一般是完全抗体，IgG类抗体一般是不完全抗体，但IgG类抗体并不都是不完全抗体，一些 IgG抗体与其特异性红细胞抗原结合，也出现肉眼可见的凝血反应或溶血反应。完全抗体和不完全抗体分类一般指抗体的免疫反应性质，即以能否出现肉眼可见免疫反应而区分。

十二、什么是规则抗体和不规则抗体？

人体内产生的抗体一般都是外来的自身体内部存在的抗原所免疫，产生的抗体，称之为规则抗体。人体内抗体的特异性是针对自身体内已有的抗原，该类抗体称之为不规则抗体。对ABO血型，A型人只有抗B，B型人只有抗A，O型人有抗A，B，AB型人没有抗A和抗B，这些抗体为规则抗体；如果A型人有抗A，B型人有抗B，AB型人出现抗A或和抗B，血型血清学确定的ABO血型，如抗原弱表达的Ax型人，这些抗体为不规则抗体。D表性阳性人体内出现的抗D抗体，抗体如果经研究确定了该抗体是针对该人红细胞表面所缺乏的D抗原表位（该D阳性红细胞是D抗原表位部分缺失型）则该抗D是规则抗体。应强调，只有在免疫遗传学，在抗原分子水平已经确定了是D抗原表位部分缺失型所产生的抗D之时，将该抗体，明确为规则抗体，但是在临床上发出D抗原表型阳性人出现抗D在对其详细深入研究之前，首先将其作为不规则抗体。

规则抗体和不规则抗体分类的根据是免疫遗传学基本理论，即抗体产生的一般规则。

十三、什么是意外抗体和非意外抗体？

1. 在临床血型血清学工作中发现的ABO血型不规则抗体，D表性阳性人体内出现的抗D抗体（不论是否已经确定其是D抗原表位不完全型），以及具有获得型B型红细胞的人检测出的抗A等，都称之意外抗体。意外抗体包括了在临床血型血清学检测中遇到的所有异常的"意外"抗体。反之，正常的，规则抗体均为非意外抗体。

2. 意外抗体和非意外抗体，分类主要是指临床血型血清学检测中遇到的异常、"意外"的抗体或者是正常的规律性抗体。D阴性人血清中检出抗D抗体，不将其称为意外抗体，因对D阴性人，应预料到并高度注意血清中可能有抗D抗体。

十四、什么是临床有意义抗体和无意义抗体？

ABO 血型、Rh血型不相容输血或胎母血型不相容妊娠等情况产生的ABO、Rh血型抗体，能够引起输血反应或新生儿溶血病，这类抗体都是临床有意义抗体，凡是在临床上能发生同种异体免疫反应，如溶血，血细胞减少等病症的血型抗体，都是临床有意义抗体。而对于有些血型系统，如P血型，即使是该血型不相容输血或妊娠，可能产生P血型同种异体抗体，但并不发生溶血性反应和新生儿溶血病，此类抗体称之临床无意义抗体。临床无意义抗体，指的是一般规律，在一般情况不产生同种异体血型免疫反应，但是个别情况，对少数病例可能产生病症，甚至严重的输血反应或新生儿溶血病，如MN血型。故临床上不能将这些抗体绝对地称之临床有意义抗体或无意义抗体。

十五、有关Rh试验的其他问题

我们将假阳性反应及假阴性反应做进一步说明。

一、假阳性反应，情况会导致红细胞定型结果为假阳性。抗D为灰色；抗C为粉红色；抗E为棕色；抗c为暗绿色；抗e为绿色；抗CDE为橘黄色。试剂中存在意外抗体，针对人群中出现频率小于1%的抗原的抗体偶尔也会引起假阳性反应。这些抗体发生率低，即使是无输血也常会有相应的抗体，抗体的混合物并不罕见，可能是除人红细胞外的其他抗原刺激产生的。

二、下面情况可导致红细胞定型出现假阴性结果。

（一）误用错误的抗血清或其他一些颜色相近的试剂。

（二）试管中没有加抗血清。

（三）一种特异性血清不能与抗原的某种变异形式反应。例如，抗e血清不一定与黑人中较常见的e抗原变异体反应。较少见的还有抗E血清也可能与EW抗原反应弱或不反应。

（四）抗血清主要含直接抗顺式Rh抗原的抗体。用其检查带有独立基因产生的个体抗原的红细胞，其结果是不可靠的。较常见的抗C血清，其与R1或r，产生的抗原的反应总比Rz或Ry产生的C抗原反应强。

（五）没有遵循试剂使用说明，而不正确地使用抗血清，例如，血清与红细胞的比例不合算，孵育温度或孵育时间不正确。

（六）离心后看结果时过度用力振摇试管，会使红细胞的弱凝集消失。

（七）抗血清中免疫球蛋白会因污染、保存不当或过期而变质。尤其是化学修饰的IgG抗体容易被某些蛋白水解酶破坏，而细菌会产生此酶。

人体红细胞上还可检出300多个其他抗原。其中一些存在于其他组织内。系统抗原存在于除成熟红细胞以外的大多数人体细胞或血小板上。临床受血者产生抗体。

几乎所有人的特定细胞系都有的抗原称为高频或“公共”抗原，其他一些称为“私有”抗原。每个已知抗原都是检查血清中特异抗体时发现的。供阅读者参考

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2015.03.25